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《饲料中维生素A的测定 高效液相色谱法》征求意见

2023年10月17日 10:14:23 人气: 27594 来源: 仪表网
  【仪表网 行业标准】近日,由中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心(北京)] 、山东省饲料质量检验所 、帝斯曼维生素(上海)有限公司 、四川威尔检测技术股份有限公司等单位起草,TC76(全国饲料工业标准化技术委员会)归口的国家标准计划《饲料中维生素A的测定 高效液相色谱法》征求意见稿已编制完成,现公开征求意见。
 
  维生素是具有高度生物学活性的有机化合物,是维持动物正常生命和生长所必需的一类特殊的营养物质。维生素 A 有天然和人工合成两类。天然的维生素 A 只存在于动物性食物中,主要存在于肝脏中,植物组织中尚未发现,人工合成的主要有维生素 A 乙酸酯、维生素 A 棕榈酸酯。用作饲料添加剂的主要以合成维生素 A 产品为主。
 
  维生素 A 不溶于水而溶于油脂和乙醇等脂溶性溶剂。分子中含多个不饱和键,化学性质活泼,对空气、热、湿度和光敏感,在光和空气中易被氧化而失去生理效能,为了增加维生素 A 的稳定性,维生素 A 除脂化、添加抗氧化剂外,目前常用的方法还有用稳定的物质明胶、淀粉进行包被。
 
  维生素 A 在维护动物视觉、维护黏膜的完整性、促进生长和生殖、影响造血机能、抗氧化、抑制肿瘤、维持正常的免疫功能等方面都起着极其重要的作用,是各种养殖动物必需添加的微量营养成分,因此添加剂预混合饲料中维生素 A 乙酸酯也常被列为国家监督抽查必检项目。
 
  现行国标 GB/T 17817-2010 已颁布实施十几年,原标准方法中皂化法检测步骤多,时间长,多年来,制标单位一直致力于研发快速准确的检测方法,固相萃取、在线固相萃取-二维液相色谱法与原皂化法比较,可节省大量化学试剂,缩短检测时间,能够满足检测方法允许误差要求。
 
  本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
 
  本文件代替GB/T 17817-2010《饲料中维生素A的测定 高效液相色谱法》,与GB/T17817-2010相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下:
 
  a)皂化提取法范围增加了精料补充料,直接提取法范围增加复合预混合饲料。直接提取法更改了定量限(见第 1 章,2010 年版的第 1 章);
 
  b)皂化提取法提取剂更改为石油醚(沸程 30 ℃-60 ℃)(见第 4 章,2010 年版第 3 章);
 
  c)第一法中增加了维生素 A 标准系列溶液(见 4.2.19)
 
  d)第一法中配合饲料、精料补充料、浓缩饲料样品制备方法更改为试样全部通过 1 mm孔筛(见 4.4,2010 年版中 3.5);
 
  e)增加了离线固相萃取法(4.5.1.2.2)和在线固相萃取法(4.5.1.2.3)及其色谱图;
 
  f)增加了液相色谱参考条件(见 4.5.2.2 和 4.5.2.3);
 
  g)增加了定性检测方法,定量检测增加多点校正(见第 4 章);
 
  h)更改了第一法中试验数据处理(见 4.6,2010 年版的 3.6.2.3);
 
  i)删除了正相色谱条件(2010 年版第 3 章);
 
  j)更改了直接提取法提取温度,由 65 ℃改为室温(见第 5 章,2010 年版第 4 章);
 
  k)增加了直接提取法中维生素 A 标准系列溶液(见 5.2.4)
 
  l)更改了直接提取法中试验数据处理(见 5.6,)
 
  m)增加校正维生素 A 及维生素 A 乙酸酯标准储备溶液浓度的方法(见附录 A)。
 
  本文件描述了饲料中维生素A的高效液相色谱测定方法。
 
  本文件中“第一法 皂化提取法”适用于配合饲料、精料补充料、浓缩饲料、复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素 A 的测定;“第二法 直接提取法”适用于复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素 A 乙酸酯的测定。
 
  本文件第一法定量限为 1000 IU/kg,第二法定量限为 20000 IU/kg。
 
  第一法 皂化提取法
 
  原理:
 
  试样用碱溶液皂化后,经液液萃取或固相萃取净化后,用高效液相色谱仪分离测定,外标法定量。
 
  仪器设备:
 
  1.高效液相色谱仪:配有紫外检测器或二极管阵列检测器。
 
  2.紫外可见分光光度计:带1cm 石英比色皿。
 
  3.分析天平:精度为0.001g、0.0001g和0.00001g。
 
  4.回流装置:圆底烧瓶和冷凝管。
 
  5.恒温水浴,控温精度±2℃。
 
  6.旋转蒸发仪。
 
  7.离心机:转速不低于 10000 r/min。
 
  8.固相萃取装置。
 
  9.氮吹仪。
 
  10.涡旋混合器。
 
  第二法 直接提取法
 
  原理:
 
  用甲醇溶液提取试样中的维生素 A 乙酸酯,高效液相色谱仪测定,外标法定量。
 
  仪器设备:
 
  1.高效液相色谱仪:配有紫外检测器或二极管阵列检测器。
 
  2.紫外-可见分光光度计:带1cm石英比色皿。
 
  3.分析天平:精度为0.0001g和0.00001g。
 
  4.超声波清洗器:频率不低于35000Hz。
 
  更多详情请见附件。
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